La Fortezza di Santa Barbara fu fatta costruire tra il 1561 e il 1563 da Cosimo de' Medici, divenuto nel 1557 oltre che duca di Firenze, anche duca di Siena.
La Fortezza Medicea è un grandioso quadrilatero in mattoni, rafforzato agli angoli da quattro bastioni pentagonali. Questa imponente ed efficiente struttura militare, progettata dall'urbinate Baldassarre Lanci afferma la volontà di dominio del Principe Mediceo sulla città e, al contempo, visualizza la fine dell'indipendenza della repubblica senese: a ribadire questo, sui salienti di tre bastioni sono scolpiti, in travertino, altrettanti stemmi del nuovo Signore e padrone di Siena.
Nella Fortezza ha sede l'Enoteca Italiana ove si possono degustare, in un ambiente altamente suggestivo, i più pregiati e selezionati vini, non solo italiani, ma pure esteri.